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刻克痒搽剂止痒机制的研究

    [摘要]目的：研究探讨刻克痒搽剂的止痒及消肿机制。方法：Schultz-dale反应、抗组胺止痒试验、角膜表面麻醉试验。结果：刻克痒搽剂原液、0.5倍稀释液及2倍浓缩液均能极显著地抑制卵蛋白致敏豚鼠离体回肠肌的过敏性收缩反应（P<0.01）；对豚鼠足背组胺致痒阈有非常显著的提高作用（P<0.01）；对豚鼠角膜具有显著的表面麻醉作用（P<0.05和P<0.01）。上述试验均呈明显的剂量依赖性。结论：刻克痒搽剂的止痒和消肿机制可能与其抗I型超敏反应减少组胺等活性物质释放、提高皮肤组胺致痒阈和表面麻醉作用有关。
    [关键词]刻克痒搽剂；皮肤瘙痒；抗组胺；表面麻醉；抗I型超敏反应
    刻克痒搽剂是以Schultz-dale反应结果为指标，通过正交设计研制的纯中药止痒搽剂。具有清热解毒、化瘀通络、祛风止痒及消肿的功效。多年来临床用于治疗蚊虫叮咬及多种皮肤病所致的肿痒，具有显著的止痒、消肿作用。本文主要探讨其作用机制。
    1 材料与方法
    1.1 刻克痒搽剂：主要由金银花、蝉蜕、徐长卿、没药组成。没药单煎，其他各药合并水煎两次，浓缩,合并煎液,醇沉处理,回收乙醇后再加入没药煎剂,最后加水制成含生药0.73g/ml的临床浓度原液.
    1.2 动物：豚鼠,由河北省实验动物中心提供,实验观察期间,饲以该中心提供的固体饲料,自由饮水.
    1.3 抗致敏豚鼠离体回肠肌过敏性收缩反应（Schultz-dale反应）：取豚鼠10只，体重200~250g。每只豚鼠两后腿各肌注5%卵蛋白（sigma 产品）生理盐水溶液0.4ml，同时腹腔注射1.0ml致敏，3周后将豚鼠放血处死，剖腹取回肠，剪成1~1.5cm肠段，置入盛有K-H液10ml的浴槽中，一端固定于浴槽底部的固定钩上，另一端与拉力换能器相连，记录收缩张力（g·100mg湿重组织-1）。前负荷1~1.5g，恒温35±0.5℃，平衡15min后开始实验。实验分刻克痒搽剂原液、0.5倍液、2倍液、扑尔敏（终浓度200μmol·L-1）组和生理盐水对照组。各组给药容量均为0.2ml。待药物与标本接触20min后，向浴槽内加入0.1%卵蛋白生理盐水0.2ml进行抗原攻击，比较各组回肠肌收缩张力的差别。并计算收缩抑制率。

对照组收缩张力-实验组收缩张力

收缩抑制率 =  ———————————————— ×100%
                        对照组收缩张力

    1.4 抗组胺止痒试验：取豚鼠35只，雌雄各半，体重300~400g。实验前一天，将豚鼠左后足背剃毛后，随机分为5组。在剃毛部位分别涂刻克痒搽剂原液、0.5倍液、2倍液、生理盐水各0.1ml，0.025%醋酸氟轻松软膏0.1g。实验当日，用粗砂纸轻轻擦伤剃毛处皮肤1cm2，按上述分组及剂量在擦伤部位分别再涂药1次。于涂药10min时用棉签擦去药物，并在该处每隔3min逐次滴加浓度递增的0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%、0.1%、0.2%、0.3%磷酸组胺0.05ml/只。观察豚鼠出现回头舔左后足背时所给予的组胺总量（μg）即为致痒阈。若组胺浓度提高到0.3%仍无回头舔足背反应则不再继续实验，即按此时的组胺总量计算。
    1.5 豚鼠角膜表面麻醉试验：取豚鼠60只，随机分为4组，即刻克痒搽剂原液、0.5倍液、2倍液、2%利多卡因4组。剪去两眼睫毛，将豚鼠固定，将右眼下眼睑下拉，使结膜囊成杯状，用滴管将药液分别滴入结膜囊内，每次滴药容量为0.25ml，待药液与角膜接触30s后，任其自然溢流。左眼同法给生理盐水作对照。用药后分别于5、10、15、20、25min测试角膜反射1次。角膜反射测定方法：用圆头小玻璃棒压迫角膜呈微凹陷状，每次压迫强度一致，每眼测试角膜6个不同部位，观察眨眼反射，记录眨眼反射负反应百分率的均值。
    2 结果
    2.1 Schultz-dale反应（结果见表1）：生理盐水对照组用抗原攻击后可产生明显收缩反应；扑尔敏组及刻克痒搽剂各组均可极显著地抑制抗原攻击的收缩反应，并随浓度增加而递增。其中刻克痒搽剂2倍液组与扑尔敏的抑制作用无明显差异，并有增高趋势，有半数标本未出现收缩反应。
    表1 刻克痒搽剂对卵蛋白致敏豚鼠离体回肠肌过敏性收缩的影响

	n	抗原攻击所致回肠肌收缩张力（m/g ·100mg湿重组织-1）	收缩抑制率(%)
生理盐水对照组	10	2.68±0.56
扑尔敏组	6	0.31±0.12 ***	88.4
刻克痒 0.5倍液组	6	1.19±0.54 ***△△△	55.6
刻克痒原液组	6	0.67±0.33 ***△△△	75.0
刻克痒2倍液组	6	0.18±0.17 ***△	93.3

    注：生理盐水对照组比较，***P<0.01，与扑尔敏组比较，△P＞0.05、△△△ P＜0.01
    2.2 抗组胺止痒试验（结果见表2）：不同浓度刻克痒搽剂和醋酸氟轻松均可极显著地提高组胺对豚鼠足背的致痒阈。其中刻克痒搽剂原液和2倍液与醋酸氟轻松的作用相近，统计无显著差异。
    表2 刻克痒搽剂对豚鼠足背组胺致痒阈的作用

	n	组胺致痒阈（m/μg）
生理盐水对照组	7	25.7+15.9
醋酸氟轻松组	7	375.0 +0 ***
刻克痒0.5倍液组	7	96.4+18.0 *** △△△
刻克痒原液组	7	282.1+158.0 *** △
刻克痒2倍液组	7	332.1+73.2 *** △

    注：与生理盐水对照组比较，*** P<0.01，与醋酸氟轻松组比较，△P＞0.05、△△△P＜0.01
    2.3 豚鼠角膜表面麻醉试验（结果见表3）。不同浓度刻克痒搽剂与2%利多卡因组均在滴药后5、10、15、20、25min角膜反射负反应百分率显著或极显著高于对照组。
    表3  刻克痒搽剂对豚鼠角膜的表面麻醉作用（n=15）角膜眨眼反射负反应百分率

	药后5min	10min	15min	20min	25min
对照组 2%利多卡因组	13.3±21.7 80.0±29.8***	19.7±19.0 60.0±19.0***	10.4±8.9 55.3±15.5***	16.7±16.7 43.3±19.0***	16.7±16.7 36.6±7.5***
对照组 刻克痒0.5倍液组	6.7±9.1 20.0±27.4*	10.0±14.9 23.3±16.0**	6.7±9.1 23.3±9.1***	10.0±9.1 33.3±16.7***	10.0±14.9 26.7±19.0**
对照组 刻克痒原液组	0.0±0.0 13.3±13.9***	.0±0.0 20.0±13.9***	03.3±7.5 26.7±14.0***	3.3±7.5 20.0±13.9***	3.3±7.5 16.7±16.7**
对照组 刻克痒2倍液组	3.3±7.5 20.0±7.4***	13.3±13.9 36.7±13.9***	0.0±0.0 26.7±14.9***	3.3±7.5 36.7±21.7***	6.7±9.1 23.3±9.1***

    注：右眼给药与左眼对照比较，*P>0.05，﹡﹡P<0.05，﹡﹡﹡ P<0.01
    3 讨论：皮肤瘙痒和红肿，是由风挟诸邪客于肌肤或热毒壅络所引起的皮肤疾病之主要症状。本方中金银花清热邪，善于化解诸毒；蝉蜕散风热，善于透疹，二者合用能够解表达邪，解毒止痒，共为君药;徐长卿祛风湿、行气通络,能助君疏散通达之功为臣药；没药活血止痛、消肿生肌，能促进皮肤病病变及其他症状的改善，又因其含有大量树胶成分，能较持久地粘附于皮肤，提高药物作用时间，故为佐使药。诸药合用，具有解毒散邪、行气活血、通络之功效，从而达到消肿、止痒之目的。局部组胺增加是引起皮肤瘙痒的直接因素。刻克痒搽剂能显著地抑制卵蛋白致敏豚鼠离体回肠肌的过敏性收缩反应，抑制I型超敏反应，减少组胺等活性物质释放；同时还能显著地提高组胺致痒阈；并且具有明显的角膜表面麻醉作用。因此，刻克痒搽剂止痒机制可能与其抑制I型超敏反应，减少组胺等活性物质释放、提高组胺致痒阈及表面麻醉作用有关。其提高组胺致痒阈的作用可能与表面麻醉作用提高了皮肤反应阈有关，也可能是刻克痒搽剂直接抗组胺和表面麻醉的协同作用。皮肤红肿与I型超敏反应所释放的组胺、激肽原酶、白三烯、前列素D2、血小板活化因子、细胞因子等活性物质作用于局部皮肤密切相关，刻克痒搽剂能显著地抑制卵蛋白致敏豚鼠离体回肠肌的过敏性收缩反应。其消肿作用的主要机制可能与抗I型超敏反应，减少活性物质释放有关。

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